ГРУППЫ КРОВИ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИХ

Переливание крови стало научно обоснованным методом и начало широко развиваться только после того, как были установлены основные принципы биологических различий крови, основанные на реакции изогем­агглютинации.

Реакция изогемагглютинации основана на смешении эритроцитов одной крови с сывороткой другой.

В 1901 г. Ландштейнер (Landsteiner) доказал физиологичность и за­кономерность реакции изогемагглютинации у здоровых людей и положил начало учению о группах крови.

В 1907 г. Янский (Jansky) и независимо от него в 1910 г. Mocc (Moss) подразделили людей по изогемагглютинационным свойствам крови на четы­ре группы, которым были даны цифровые обозначения.

Рис. 196. Реакция изогемагглютинации. а — положительная; б — отрицательная.

В настоящее время цифровые обозначения заменены международной буквенной номенклатурой (табл. 4), которой и следует придерживаться.

Таблица 4

Сопоставление различных номенклатур групп крови

Буквенная номенклатура до известной степени объясняет сущность происходящих процессов.

Сыворотка крови содержит соответствующие агглютинины, обозна­ченные малыми греческими буквами а и β (альфа и бета).

Реакция агглютинации наступает только тогда, когда эритроциты, содержащие агглютиноген А, попадают в сыворотку, имеющую агглютинин а, или же эритроциты, содержащие агглютиноген В, встречаются в сыво­ротке и агглютинином β. В табл. 5 представлена характеристика групп крови.

Таблица 5

Группа I (Oαβ). Эритроциты лишены агглютиногенов (0) и по­этому ни одна сыворотка не агглютинирует их. Сыворотка содержит оба агглютинина — а и β — и, следовательно, обладает способностью агглю­тинировать эритроциты всех групп, за исключением одноименной.

Группа II (Aβ). Эритроциты обладают одним агглютиногеном А и агглютинируются сыворотками двух групп, где имеется соответствую­щий агглютинин а, т. е. группы ноль и В. Сыворотка содержит агглюти­нин β и агглютинирует крови с соответствующим агглютиногеном В, т. е. группы В и АВ.

Группа III (Ba). Эритроциты содержат агглютиноген В и агглю­тинируются сыворотками с агглютинином β, т.

Группа IV (ABO). Эритроциты содержат оба агглютиногена AB и агглютинируются сыворотками трех групп, за исключением одноименной, т. е. АВ. Сыворотка совершенно лишена агглютининов и не агглютини­рует ничьих эритроцитов.

В Советском Союзе в свое время при обозначении групп крови была принята номенклатура Янского. Придерживаясь буквенных обозначений, сокращенно группы крови обозначаются 0 (I), А (II), В (III) AB (IV).

Многочисленными исследованиями установлено, что фактор А раз­деляется на три подгруппы, которые условно обозначаются A₁, A₂ и A₃. Различие между подгруппами зависит только от силы агглютинации эри­троцитов. Эритроциты крови подгруппы A₁ обладают большой агглюти- набильностью и всегда дают быструю и крупнозернистую агглютинацию, в то время как эритроциты подгруппы A₂ агглютинируются медленно, складываются в мелкие комочки и дают менее четкую агглютинацию, а агглютинация подгруппы A₃ всегда едва заметна.

Эти различия в силе агглютинации могут дать повод к ошибочному определению группы крови. Человек рождается уже с готовыми агглюти­ногенами в красных кровяных тельцах, так что определение группы крови новорожденного по его эритроцитам не представляет никаких затруднений. Агглютинины у новорожденных выражены очень слабо, но постепенно титр их усиливается и у годовалого ребенка они определяются очень отчет­ливо. Групповая характеристика человека является стойким свойством.

Методика определения группы крови. Определе­ние группы крови должно производиться очень тщательно, так как малейшее отклонение от установленных правил влечет за собой тяже­лые, нередко роковые ошибки.

Для определения групповой принадлежности крови человека с по­мощью реакции агглютинации достаточно иметь только две сыворотки — группы А и группы В. Пользуясь ими, всегда можно решить, к какой группе относится исследуемая кровь. Для устранения возможных оши­бок, происходящих вследствие порчи одной из указанных сывороток, в реакцию вводится дополнительно контрольная сыворотка группы 0. Эта сыворотка не определяет групповой принадлежности, а лишь контро­лирует работу сывороток А и В.

Реактивом для исследования неизвестных эритроцитов служат стан­дартные изоагглютинирующие сыворотки, приготовленные из человеческой крови. Стандартные сыворотки содержат точно определенный агглю­тинин (один или оба). На ампуле с сывороткой имеется этикетка с обозна­чением группы и титра. Для определения группы крови рекомендуется пользоваться активными сыворотками, имеющими титр не ниже 1 : 32. Сохраняются сыворотки в сухом, прохладном месте в течение 3 месяцев.

Более точные данные определения групповой принадлежности полу­чаются при пользовании стандартными сыворотками и стандартными эритроцитами. Это так называемая двойная, или перекрестная, реакция, которая производится лишь в лабораториях и на станциях переливания крови. В повседневной работе пользуются простой реакцией изогемагглю­тинации.

Исследование неизвестных эритроцитов стандартными сыворотками (простая реакция) лучше всего производить на белой фарфоровой тарелке или большом стекле. По 1—2 капли сывороток наносят в следующем порядке: сыворотку группы 0 — в середине вверху тарелки, сыворотку группы А — слева, а сыворотку В — справа. После этого делается укол иглой Франка.

Различают четыре классические реакции (рис. 197).

1.     При отсутствии агглютинации во всех трех сыворотках исследуе­мая кровь принадлежит к группе 0 (I).

2.     При отсутствии агглютинации в сыворотке группы А, но при наличии агглютинации в сыворотке группы 0 и В исследуемая кровь является группы А (II).

3.      При отсутствии агглютинации в сыворотке группы В, но при нали­чии агглютинации в сыворотке 0 и А исследуемая кровь относится к группе В (Ш).

4.     При наличии агглютинации во всех трех сыворотках исследуемая кровь будет группы AB (IV).

Никаких других соотношений при этой реакции не бывает. Если же при определении группы крови получается нечеткая реакция и возникает сомнение, то следует взять другие стандартные сыворотки и с ними повтор­но определить группу крови.

Если результат повторного исследования методов простой реакции неясен и возникает подозрение на аутоагглютинацию, рекомендуется исследовать кровь в лаборатории с помощью двойной реакции (по стан­дартным сывороткам и стандартным эритроцитам).

Рис. 197.

Группа Ajj — агглютинация отсутствует в сыворотке AIj но имеется в сыворотке O_j и Bjjj- Группа Bjjj — а г г л ю ти н а ц и я о тс у тс тв у ет в сыворотке Bjj₁ но имеется в сыворотке Oj и Ajj- Группа ABj_v—агглютинация имеется во всех трех сыворотках.

Ошибки при определении группы крови. При определении группы крови могут возникнуть ошибки, которые будут зависеть: 1) от технических причин, 2) от неполноценности стандартных сывороток и биологических особенностей испытуемой крови.

1.       Ошибки технического порядка:

а)     неправильное расположение сывороток на тарелке. Вместо нане­сения сыворотки группы В направо ее наносят налево. Особенно легко ошибиться, если применяемые сыворотки неокрашены;

б)    неправильное количественное соотношение сывороток и эритро­цитов; крови взято больше, чем требуется для реакции;

в)    неправильное пользование пипетками для взятия сывороток. Для каждой сыворотки необходимо применять отдельную пипетку;

г)    несоблюдение положенного для реакции агглютинации време­ни. Когда реакция не выдержана до 3 минут, агглютинация может не наступить, если в испытуемой крови имеются слабые агглютиногены и результат будет учтен неправильно. Наоборот, при передержанной более 5 минут реакции может произойти высыхание капель с краев, симулирую­щее агглютинацию, что также ведет к ошибке.

2.     Ошибки, зависящие от применения неполноценных стандартных сывороток и от биологических особенностей испытуемой крови:

color=black face="Times New Roman">а)    при применении слабых стандартных сывороток с титрами ниже 1 : 32 или с истекшим сроком годности может слабо и поздно наступить агглютинация (рис. 198, а). Рекомендуется повторно проверить группу крови с другой серией сывороток;

б)    при наличии в испытуемой крови слабого агглютиногена А (под­группа A₂—A₃) агглютинация с сывороткой В, несмотря на ее допустимый титр, наступает поздно и мелко, но к 3—5 минутам делается более ясной (рис. 198, б). При недоучете этого свойства крови могут наблю­даться ошибки в случаях, когда кровь группы A₂B определяется, как группа В, или кровь группы A₂ определяется, как группа 0 (рис. 198, в);

в)    ошибки возможны, если кровь обладает свойством панагглютина­ции или аутоагглютинации, т. е. дает неспецифическую агглютинацию со всеми сыворотками и даже со своей собственной сывороткой. Этот тип реакции при выдерживании дольше 2—3 минут ослабевает, в то время как истинная реакция к этому времени обычно усиливается. Для устранения панагглютинации рекомендуют тарелку с реакцией на 5 минут поместить в термостат при температуре 37° (рис. 198, г).

Недопустимой ошибкой является перепутывание понятия о ретро- плацентарной и плацентарной крови.

Ретроплацентарная кровь, вытекающая из родовых путей роженицы до и после выхода последа, является кровью матери.

Плацентарная кровь, т. е. кровь, изливающаяся при пересечении пуповины, является кровью плода.

Нередко кровь матери и кровь новорожденного разногруппны.

Категорически запрещается определять группу крови роженицы по ретроплацента р- ной крови.

Значение кровяных групп при переливании крови. Открытие групп крови у людей пролило свет на причины ослож­нений, которые имели место при переливании крови от одного человека другому. Руководствуясь свойствами агглютинацпонных групп, устано­вили, что несовместимость групп крови донора и реципиента являлась истинной причиной тяжелых смертельных осложнений, наступающих в результате агглютинации эритроцитов крови донора с последующим гемолизом их в кровеносном русле реципиента. Было установлено, что идеальным условием является переливание крови одноименной группы, ибо при смешении их не может произойти агглютинации и гемолиза 0→0; A→A; B→B; AB→AB.

Однако понятие совместимости крови не ограничивается только одно­именными группами. Оттенберг выдвинул правило, что только эритроциты донора могут агглютинироваться сывороткой реципиента, а не наоборот,

Рис. 198.

А: а — при применении слабых стандартных сывороток реакция мелкая; б — эта же кровь, но с применением активных стандартных^ сывороток. Б: а — незаконченная реакция при слабом факторе Аг в эритроцитах исследуемой крови; б — эта же кровь, реакция закончена к 3 — 5 минутам. В; а — незаконченная реакция со слабым фактором A₂ в подгруппе A₂B; б—эта же кровь, реакция'закончена к 3 — 5 минутам. Г: а — неспецифическая^агглютинация — «панагглютинация» при комнатной тем­пературе;^ — «панагглютинация» устранена после 5 минут выдерживания в термостате при температуре 37°.

Бояться обратного явления (агглютинации собственных эритроцитов больной введенной при трансфузии сывороткой) обычно не приходится, так как сыворотка донора настолько разводится кровью больной, что теряет свою агглютинационную силу. Это свойство сыворотки — терять свои агглютинационные свойства при разведении — дает возможность пользоваться неодноименными группами. Эритроциты группы 0 не содер­жат агглютиногенов и, будучи смешаны с сыворотками других групп, совершенно не изменяются. Поэтому лица этой группы носят название универсальных доноров и кровь их может быть перелита всем независимо от групповой принадлежности.

Метод переливания крови от универсального донора полностью оправ­дал себя. Только при очень массивных переливаниях (более 1 л одномомент­но) сильно обескровленному человеку кровь универсального донора может представить некоторую опасность и в таких случаях лучше пользоваться одноименной группой (С. И. Спасокукоцкий).

Человеку с группой крови OI можно перелить только кровь его груп­пы, так как в сыворотке имеются оба агглютинина: и а, и β.

size=2 color=black face="Times New Roman">Группа крови AB (IV) в сыворотке совершенно не содержит агглю­тининов, следовательно, может воспринять эритроциты любой группы, не агглютинируя их. Поэтому лица группы AB носят название универсаль­ных реципиентов и им может быть перелита кровь доноров всех групп (табл. 6).

Таблица 6

Одним из существенных моментов переливания крови является под­бор донора. Методом, наиболее распространенным и соответствующим современным данным, является подбор донора при помощи стандартных сывороток: определяется группа крови больного и подбирается донор одноименной или совместимой группы. Метод этот таит в себе известные опас­ности: стандартные сыворотки могут портиться и терять свою изоагглю- тинационную силу, могут быть ошибки в их определении и обозначении, вследствие чего донор будет подобран неправильно. Поэтому давно уже возникла необходимость не ограничиваться при подборе донора только определением группы, а контролировать получаемые данные еще непосред­ственным смешиванием крови донора и реципиента, т. е. производить пробу на совместимость. Для этого у больного из вены берут 3—5 мл крови без цитрата. После свертывания крови осторожно отсасывают сыворотку. Проба на совместимость крови донора с сывороткой реципиента произ­водится перед каждым переливанием крови и заключается в следующем. На тарелку наносят 2 капли сыворотки больного и к ней добавляют небольшую каплю крови донора. Наблюдение ведется в течение 5 минут. После добавления 1—2 капель физиологического раствора определяют результат пробы. Появление агглютинации указывает на недопустимость переливания данной крови.

Следует отметить, что проба на совместимость является лишь допол­нительной, контрольной пробой и не может заменить обязательного опре­деления группы крови, а также биологической пробы. Биологическая проба также является контрольной и позволяет в ряде случаев выявить ошибку в определении группы крови, а также индивидуальную несовме­стимость крови донора и реципиента. Биологическая проба производится по следующим правилам. После быстрого переливания первых 20 мл крови трубку, по которой она течет, закрывают зажимом и делают 3—5-минут­ную паузу. Затем переливают еще 20 мл крови и снова делают такую же паузу, после чего опять переливают 20 мл крови и снова прерывают транс­фузию на 3—5 минут. При отсутствии жалоб со стороны больной и сим­птомов несовместимости после троекратной биологической пробы разре­шается переливать кровь без перерыва.